口腔免疫学实验技术指导

全书共12章，包括口腔免疫学概述、口腔样本的收集和处理技术、免疫细胞分离和纯化技术、免疫细胞的功能和亚群检测技术、口腔抗原的制备、抗体制备、口腔组织液相关抗原抗体的检测技术、免疫组织化学技术、免疫荧光技术、口腔细菌的免疫学鉴定、流式细胞术及其在口腔医学中的应用、免疫组学技术。该书编写人员均为近年来在教学、科研和临床工作中成就显著的中青年医师、教师，在汇集现代免疫学前沿进展和实践的基础上，结合临床和教学过程中学生的意见，综合了口腔免疫学相关的实用技术编写而成。

第一章 口腔免疫学概述/1

第一节 口腔免疫系统组成与功能/2

一、口腔黏膜免疫系统/2

二、牙髓和根尖周免疫系统/3

三、牙周免疫系统/4

四、唾液免疫系统/4

五、口腔淋巴组织/5

第二节 口腔固有免疫/6

一、唾液免疫/6

二、龈沟液免疫/9

三、口腔体液中非特异性细胞免疫/9

四、口腔黏膜免疫/10

五、口腔微生物免疫/10

第三节 口腔适应性免疫/11

一、口腔抗原/12

二、口腔适应性免疫应答/12

三、抗体在口腔免疫中的作用/12

第二章 口腔免疫实验样本采集与保存技术/14

第一节 唾液样本采集与保存技术/15

一、人唾液样本的采集技术/15

二、实验动物唾液采集技术/16

三、唾液样本保存技术/17

第二节 龈沟液采集与保存技术/18

一、龈沟液采集技术/18

二、龈沟液保存技术/21

三、龈沟液定量分析技术/22

四、龈沟液成分分析技术/23

第三节 口腔组织样本采集与保存技术/24

一、人口腔组织样本采集技术/25

二、实验动物口腔组织样本采集技术/27

三、口腔组织样本处理及保存技术/28

第四节 口腔微生物采集与保存技术/31

一、口腔微生物样本采集技术/32

二、菌斑样本采集技术/33

三、口腔微生物样本运送技术/36

四、口腔微生物样本保存技术/37

第五节 血液样本采集与保存技术/39

一、人血液采集技术/40

二、实验鼠血液采集技术/41

三、实验兔常用采血技术/44

四、实验动物采血量与采血方法选择/45

五、血液样本保存技术/46

第三章 流式细胞术/47

第一节 流式细胞仪/48

一、流式细胞仪的基本结构/48

二、分析型流式细胞仪的基本原理/49

三、分选型流式细胞仪的基本原理/50

第二节 流式细胞术检测参数与流式图/51

一、流式细胞术检测参数/51

二、常用流式图的分类/52

第三节 口腔组织细胞表面分子流式检测技术/54

第四节 口腔组织细胞胞内细胞因子流式检测技术/56

第五节 口腔细胞周期流式检测技术/58

一、仪器耗材/58

二、实验试剂/59

三、操作步骤/59

第六节 口腔细胞凋亡流式检测技术/61

一、AnnexinV/PI双参数检测技术/61

二、细胞DNA含量分析技术/62

第七节 流式细胞术的质量控制/63

一、样本制备/63

二、对照设置/64

三、数据分析/64

第四章 免疫细胞分离纯化技术/66

第一节 人外周血单个核细胞分离纯化技术/67

第二节 人外周血单核细胞分离纯化技术/69

一、黏附分离纯化技术/70

二、Percoll连续密度梯度离心分离纯化技术/70

三、羰基铁粉分离纯化技术/71

第三节 人外周血淋巴细胞选择性分离纯化技术/72

一、T淋巴细胞选择性分离纯化技术/72

二、B淋巴细胞选择性分离纯化技术/77

三、NK细胞选择性分离纯化技术/78

第四节 人外周血中性粒细胞分离纯化技术/80

一、右旋糖酐分离纯化技术/80

二、免疫磁珠分离纯化技术/81

三、流式细胞分选仪分离纯化技术/81

第五节 树突状细胞分离纯化技术/81

一、小鼠骨髓来源树突状细胞分离纯化技术/82

二、人外周血单个核细胞来源的树突状细胞分离纯化技术/83

第六节 口腔体液免疫细胞分离纯化技术/84

一、口腔体液单个核细胞分离纯化技术/84

二、口腔体液免疫细胞亚群选择性分离纯化技术/85

第五章 免疫细胞亚群鉴定与功能检测技术/86

第一节 免疫细胞表面标记检测技术/87

一、免疫荧光技术/87

二、微量细胞毒试验/88

三、花环形成试验/88

四、免疫酶技术/89

五、流式细胞术/89

第二节 T淋巴细胞亚群鉴定与功能检测技术/90

一、CD4+/CD8+T细胞亚群鉴定技术/91

二、CD4+Th细胞亚群鉴定技术/93

三、T淋巴细胞增殖实验/98

四、T淋巴细胞杀伤实验/101

第三节 B淋巴细胞亚群鉴定与功能检测技术/111

一、B淋巴细胞亚群鉴定技术/111

二、B淋巴细胞功能检测技术/112

第四节 NK细胞表型与功能检测技术/113

一、NK细胞表型检测技术/114

二、NK细胞功能检测技术/115

第五节 树突状细胞表型与功能检测技术/118

一、树突状细胞表型检测技术/118

二、树突状细胞功能检测技术/119

第六节 吞噬细胞亚群鉴定与功能检测技术/123

一、巨噬细胞表面标志物检测技术/124

二、中性粒细胞表面标志物检测技术/124

三、巨噬细胞功能检测技术/125

四、中性粒细胞功能检测技术/132

第六章 抗原制备技术/135

第一节 天然抗原制备技术/136

一、天然组织抗原制备技术/136

二、口腔细菌抗原制备技术/143

三、口腔肿瘤组织抗原制备技术/145

第二节 人工抗原制备技术/147

一、载体类型/148

二、半抗原-载体偶联技术/148

三、人工抗原纯化与鉴定技术/151

第三节 佐剂的使用/152

第七章 抗体制备技术/153

第一节 多克隆抗体制备与鉴定技术/154

一、多克隆抗体制备技术/154

二、多克隆抗体效果评价/156

第二节 单克隆抗体制备与纯化保存技术/157

一、单克隆抗体制备技术/157

二、单克隆抗体纯化技术/160

三、单克隆抗体保存技术/161

四、单克隆抗体效果评价/161

第三节 基因工程抗体及其制备技术/162

一、基因工程抗体类型/162

二、基因工程抗体制备技术/166

三、基因工程抗体表达系统/167

四、单链抗体制备技术/168

五、纳米抗体制备技术/170

第八章 口腔体液相关抗原抗体检测技术/172

第一节 抗原抗体反应/173

第二节 凝集反应/173

一、唾液中可溶性HAB血型物质检测/174

二、梅毒螺旋体抗体检测/176

第三节 沉淀反应/176

一、沉淀反应技术分类/177

二、高敏C反应蛋白测定/178

第四节 免疫酶技术/179

一、酶联免疫吸附试验/180

二、酶联免疫斑点试验/184

第五节 化学发光免疫分析技术/186

一、直接化学发光免疫分析技术/187

二、化学发光酶免疫分析技术/187

三、电化学发光免疫分析技术/188

第六节 蛋白免疫印迹技术/188

一、实验材料和试剂/189

二、操作步骤/189

第七节 口腔体液相关抗原抗体检测技术的应用/193

第九章 免疫组织化学技术/194

第一节 石蜡组织切片免疫组织化学染色技术/195

一、染色技术分类/195

二、染色技术基本原理/196

三、抗原修复/196

四、样本准备/197

五、样本制片/197

六、抗体准备/198

七、试剂配制/198

八、操作步骤/198

第二节 冰冻组织切片免疫组织化学染色技术/199

第三节 免疫细胞化学染色技术/200

第四节 常见问题及处理/200

一、防脱片处理/201

二、对照/样本无染色/201

三、假阴性或弱阳性/201

四、假阳性染色/202

五、非特异性染色/203

第十章 免疫荧光技术/205

第一节 直接免疫荧光技术/206

一、基本原理/206

二、荧光素选择的标准/206

三、常用的荧光色素/207

四、直接免疫荧光技术特点/208

五、实验试剂/208

六、操作步骤/208

第二节 间接免疫荧光技术/209

一、基本原理/210

二、实验步骤/210

第三节 其他免疫荧光技术/211

一、抗补体免疫荧光技术/211

二、时间分辨荧光免疫分析技术/211

三、荧光偏振免疫分析技术/211

第十一章 口腔微生物免疫鉴定技术/213

第一节 微生物免疫鉴定技术/214

一、微生物抗原检测技术/215

二、微生物致病毒力检测技术/215

三、微生物感染产生的特异性抗体检测技术/215

第二节 口腔微生物免疫标记鉴定技术/216

一、免疫荧光技术/216

二、酶联免疫吸附试验/217

三、免疫金标记技术/218

第三节 口腔微生物凝集反应鉴定技术/219

一、直接凝集反应/220

二、间接凝集反应/221

第四节 口腔微生物免疫磁珠鉴定技术/222

一、免疫磁珠技术基本原理/222

二、免疫磁珠鉴定口腔微生物技术操作步骤/223

第五节 口腔微生物免疫芯片鉴定技术/223

一、免疫芯片技术基本原理/224

二、免疫芯片技术操作步骤/224

第十二章 免疫学研究新技术/226

一、单细胞分析技术/227

二、CRISPR/Cas9基因编辑技术/227

三、诱导多能干细胞产生巨噬细胞技术/227

四、TRACeR-Ⅰ技术/228

五、高通量测序技术/228

六、毛细管电泳免疫学技术/228

七、相分离递送技术/229

八、免疫学人工智能研究技术/229

参考文献/230