NAC转录因子调控植物抗逆反应的分子机理

本书首先分析ANAC069基因在非生物胁迫条件下以及在不同组织部位和发育阶段的表达模式。克降启动子，进行顺式元件分析，检测其活性，鉴定ANAC069的上游表达调控因子。构建过表达载体，获得AVAC069转基因株系，同时筛选纯合突变体株系，对不同株系进行非生物胁迫处理，根据表型、组化、生理指标及逆境标志基因的表达确定ANACO69基因在植物抵御非生物逆境反应中的功能。分析ANAC069是否有转录激活活性，寻找可能的互作蛋白。利用Affymetrix拟南芥基因芯片分析ANAC069蛋白调控的下游代谢途径及靶基因：通过对靶基因启动子进行分析，预测并证实了ANAC069蛋白调控下游基因表达时识别的主要元件。最终构建了ANAC069所介导的植物逆境反应的分子模型：非生物胁迫信号先激活ATDOF5.8基因表达，ATDOF5,8蛋白反过米激活ANAC069的表达，被激活的ANAC069蛋白主要通过识别C[A/G]CG[T/G]核心序列来调控其下游靶基因的表达，导致一系列逆境反应相关的生理生化变化，包括降低ROS的清除能力和SOD、POD,GST的活性，改变脯氨酸合成及增加失水率等，最终提高植物对非生物胁迫的敏感性。